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太阳集团ST细胞低血清培养基
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太阳集团ST细胞低血清培养基是ok138cn太阳集团古天乐针对ST细胞开发的低血清培养基(Cat. No:621)和低血清维持培养基(Cat. No:631),大幅度减少血清使用量,血清浓度可降低至1-2%,细胞能保持良好的细胞生长速率和细胞形态,降低生产纯化成本,支持细胞高密度生长,能够快速实现细胞的放大培养和工业化生产。
 
 
案例分享
1. ST细胞3L转瓶培养实验:
 
图1. ST细胞低血清培养生长情况
 
图2. ST细胞低血清培养生长情况
 

A: 低血清培养基621+2%NBS

 B: 对照MEM培养基+10%NBS

C: 对照MEM培养基 +10%NBS

D: 对照MEM培养基 +10%NBS

ST细胞接种至3L玻璃转瓶中,用低血清(2%NBS)培养环境培养72小时,细胞能形成致密单层,具有清晰的轮廓、立体感较强,与对照MEM培养基中细胞形态无差异,细胞密度达到5.95×106cell/mL,与对照MEM培养基中无明显差异。
 
2. ST细胞转瓶接接种猪瘟病毒维持培养实验:
 

A: 低血清培养基621+2%NBS培养3d

   B: 低血清培养基631维持3d

C: 低血清我培养基631维持6d

 D: 低血清培养基631维持9d

 
ST细胞接种至3L玻璃转瓶中,在621低血清(2%NBS)培养基中培养72小时,细胞能形成致密单层,具有清晰的轮廓、立体感较强;此时接种猪瘟病毒,并更换631维持培养基(添加0.5%NBS)进行猪瘟病毒生产,维持72h-96h后换收获转瓶内全部液体,并添加新鲜631维持培养基继续维持;随后每72h-96h收获一次,更换新鲜维持培养基,ST细胞可保持形态无明显差异,在使用631病毒维持液进行维持时,可收获5次以上。
 
3. DISK固定床反应器培养ST细胞连续生产猪瘟病毒
 
 
ST细胞接种至14LDISK反应器中,用低血清培养基621(2%NBS)培养环境培养4d,载体除基本贴满,细胞贴附部分呈黄色,根据葡萄糖消耗,至少扩增6倍; 此时接种猪瘟病毒,并换用631(0.5%NBS)维持培养基进行维持培养,控制葡萄糖消化,631维持培养基结合DISK固定床可持续维持细胞生产猪瘟病毒十五天以上,每天收获1-2个罐体积猪瘟病毒原液,经兔热反应检测,50万倍检测合格。
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